Химическая и биологическая безопасность

Мембранные методы разделения нашли широкое применение в различных областях технологии сравнительно недавно (с 60–70 гг. XX века), тем не менее, они существенно ускорили развитие процессов газоразделения, совершенствование процессов очистки воды. В этих областях мембранная технология не отстает от других по уровню математического и компьютерного обеспечения. Описано много теоретических обоснований и математических расчетов процессов мембранного разделения биологических жидких смесей, но реальное их осуществление до сих пор практически не достигнуто. Такие различия объясняются свойствами разделяемых объектов и, прежде всего, недостаточным объемом информации об этих свойствах. Так, при разделении биологических смесей чаще всего приходится иметь дело с поликомпонентными системами, физико-химические характеристики которых неизвестны и малодоступны для измерения. Часто и состав разделяемой смеси не может быть определен. В настоящей работе приведены примеры успешного разделения продуктов биологического синтеза: дифтерийного анатоксина, столбнячного анатоксина, лейкоцитарного экстракта. Обсуждается также "функциональное" калибрование как предварительный этап мембранного разделения биологических смесей. Дифтерийный анатоксин – обезвреженный формалином дифтерийный токсин – жидкий продукт культивирования дифтерийной палочки на среде Лингуда (см. ниже), очищенный методом кислотно-солевого осаждения. Среда Лингуда – триптический перевар говяжьего мясного бульона, содержащий компоненты ниже 10 кД. Столбнячный анатоксин – обезвреженный формалином столбнячный токсин – жидкий продукт культивирования столбнячной палочки на среде гидролизата казеина, очищенный методом кислотно-солевого осаждения. Условный "референс" – лейкоцитарный экстракт, полученный после многократного замораживания и оттаивания в воде лейкоцитов миндалин человека с последующим осветлением на центрифуге при 20000g и микрофильтрацией на мембране GSWP (0,2 мкм) (Millipore, USA). "Рабочий" лейкоцитарный экстракт из лейкоцитов крови человека, полученный по той же методике. При использовании мембранного разделения были улучшены показатели специфической активности дифтерийного и столбнячного анатоксинов. Уникальный выбор пары мембран для двуступенчатой ультрафильтрации лейкоцитарного экстракта позволил получить из него почти гомогенный активный продукт. Использование одного калибранта и в смеси его с другими калибрантами давали различные величины его коэффициента задержания. Показана неравноценность разделяющей способности мембран с одинаковым номинальным пределом исключения. НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова РАМН.

Клонировали ген трихозантина (растительного токсина) в вектор экспрессии. Плазмиду выделили, обработали рестриктазами, провели анализ аминокислотной последовательности фрагментов и восстановили полную аминокислотную последовательность трихозантина. Экспрессировали плазмиду в бактериях и очистили на Ni-NTA-агарозе рекомбинантный трихозантин (30 кД), обладающий РНК-N-гликозидазной активностью и специфически реагирующий с антителами TE1 класса IgE. КНР, Sch. Life Sci. and Biotechnol., Shanghai Jiaotong Univ., Shanghai. Библ. 7.