|
|
2006 №4 (28)
[Содержание]
3.2. БИОЛОГИЧЕСКИ ОПАСНЫЕ БИОТЕХНОЛОГИИ И ПРОИЗВОДСТВА
4.ХБ.184. Получение каталитически неактивной А-субъединицы токсина MLIII из омелы.Певзнер И.Б., Агапов И.И., Пфюллер У. Биотехнология. 2005, № 1, с. 3 –10. Рус.; рез. англ. На основе клонированного ранее гена предшественника токсичного лектина MLIII из омелы созданы мутантные формы А-субъединицы этого белка, несущие замены от 2 до 4 важнейших аминокислот в составе активного центра молекулы. Путем определения ферментативной активности полученных мутантов в бесклеточной системе синтеза белка показано, что замены аминокислот приводят к частичной инактивации токсинов. Наибольшее снижение активности А-цепи MLIII наблюдали при одновременной замене четырех аминокислот: Е166А, R169L, Е197D и W200S. Данная мутантная форма MLIIIA предлагается для разработки генно-инженерных вакцин и изучения детальных механизмов белкового транспорта в клетках. Россия, ФГУП "ГосНИИгенетика", Москва, 117545. Библ. 35.
Экспериментально обосновано, что вакцина со сниженной концентрацией микробов в ампуле вследствие более сбалансированного соотношения микробных клеток и защитной среды, обладает новыми качественными характеристиками, превосходящими стандартные коммерческие образцы (жизнеспособность, термостабильность). Показано, что в условиях регламентированного режима лиофилизации повышается эффективность стабилизации свойств микробных клеток у препарата с меньшей концентрацией вакцинной суспензии и снижением ее объема в ампуле. Впервые оптимизировано количество человеко-доз в ампуле с коммерческим препаратом, обладающим преимуществом в области практического применения, заключающемся в удобстве при иммунизации небольших коллективов (от 20 до 50 человек). Впервые отработана и внедрена в биотехнологию производства вакцины чумной живой сухой и, соответственно, в нормативную документацию концентрация микробных клеток в вакцинной суспензии (1–4)´1010 в объеме 1 мл в ампуле.
|